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核酸检测问题较多

时间:2022-06-24 11:40:12 来源:网友投稿

下面是小编为大家整理的核酸检测问题较多,供大家参考。希望对大家写作有帮助!

核酸检测问题较多

核酸检测问题较多4篇

第1篇: 核酸检测问题较多

核酸检测应注意的几个问题*

余霖 陈庆恺 何子毅

【期刊名称】临床输血与检验

【年(卷),期】2017(019)005

【总页数】3

【关键词】【关键词】 核酸检测 Cobas s201 样本 试剂使用率 仪器维护

·综述·

提高经血传播传染病的检出率,降低经血传播传染病一直是保证血液安全的重要课题。酶联免疫法(ELISA)作为传统检测手段,由于方法学上的局限性,加之“窗口期”较长等原因,存在漏检现象,严重影响输血安全性[1]。而核酸检测(Nucleic acid test,NAT)对象为病毒核酸,可以明显缩短ELISA的“窗口期”[2];
此外,NAT还可以检测出因病毒变异、免疫静默感染等造成的漏检[3]。欧美国家在20世纪90年代陆续将NAT纳入常规血液筛查中,我国2012年发布的《卫生事业发展“十二五”规划》中,明确提出了“到2015年,血液筛查核酸检测基本覆盖全国”的目标[4]。我站从2004年开始科研性地应用核酸检测无偿献血者血样本,已完成了50多万例次的核酸样本检测,在样本管理、试剂管理、设备管理和防污染方面积累了一定的经验,现总结如下。

1 样本管理 在影响血液筛查结果的众多因素中,样本因素是首要的。在我国,涉及到NAT样本要求的法规主要包括《血站技术操作规程(2015版)》、《全国艾滋病检测技术规范》、《临床基因扩增检验实验室工作规范》等。《血站技术操作规程(2015版)》于2016年3月1日正式实施,各级采供血机构必须执行,该法规对样本管理提出了明确要求,用于血样采集的样本管应采用EDTA-K2

抗凝剂且为带有分离胶的真空负压试管,同时对样本的离心条件和保存运输温度作了较详细的规定。在《血站核酸检测实验室质量保证指南》中还规定了核酸样本采集后离心的时间要求、核酸样本的质量核查要求,即无溶血、无稀释、无脂血、足量,并且样本管完整、标识符合规范,对不合格样本管理也作了具体规定,存在质量问题的样本一般在样本交接时目视判断。罗氏核酸检测试剂说明书建议EDTA-K2抗凝全血在2℃~25℃下可保存48 h,随后在2℃~8℃下可保存72 h,血浆分离后在2℃~8℃下可保存7 d,在低于–18℃下可保存20 d,最多可冻融3次。

在实际工作中,绝大多数情况下按照试管生产厂家提供的离心参数(如BD核酸专用试管推荐的离心参数为:25℃,1 100 g离心力,离心10 min),可以实现离心后分离胶将血浆和红细胞分隔,但仍有离心后分离胶未完全分隔血浆和红细胞的情况。回顾2013年1月~2015年8月混样失败的数据,以夏季炎热月份明显多于其他月份,表现为离心后有分离胶液滴漂浮在血浆表面,混样时分离胶液滴堵塞加样针头引起失败。出现上述情况的原因可能是分离胶在高温下变性,也可能与试管本身的质量或试管的运输、储存条件有关;
混样失败还与抗凝不充分时有纤维蛋白析出和严重脂肪血样本在低温保存后血浆上层出现白色脂肪滴有关。

核酸样本采集后要求在4 h内送抵实验室,若不能保证就要在采血现场离心,因此部分采血点要配备离心机,样本离心后放置4℃±2℃冰箱保存,核酸样本从采血点运送到实验室一般采用冷藏运输箱。但在运输过程中,箱内实际温度可能已高于2℃~10℃,尤其在夏季更难保证。姚凤兰等[5]分析不同温度、时间和不同采血管对诺华NAT结果的影响,结果显示联检阳性的样本最好在2 d内鉴别检测。本实验室也对不同温度下不同浓度阳性样本检出率做了初步比较,结果显示室外温度(30℃左右)、室温(25℃左右)和冷藏冰箱(4℃±2℃)条件下,高、中、低3种浓度阳性样本检出率没有明显差异。这说明当环境温度符合罗氏核酸试剂对标本要求时,仍能保证检测的灵敏度和准确度,尚需进一步证实。

总之,应使用核酸检测专用试管,采血时按规范要求完成样本的抗凝处理,严格按照核酸试管生产厂家的离心要求操作、4 h内离心,2℃~10℃保存运输,72 h内完成检测。

2 试剂管理 目前核酸试剂的成本较高。回顾2013年1月~2016年1月我站试剂使用数据,平均每年的试剂有效使用率{试剂有效使用率=每月实际检测人份数/[每月试剂使用总测试孔数×480(1盒试剂可做480人份)/96(1盒试剂可做96孔测试)]×100%}在逐步提高,2015年已达86%以上,2016年达90%左右;
影响试剂有效使用率的因素主要为日常室内质控、室间质评、单独检测血小板样本和混检阳性样本拆分等[6]。由于加强了实验室人员的培训和仪器的维护保养,使人为因素和仪器故障引起的试剂损耗大大减少,试剂的主要损耗为单独检测血小板样本。当我站献血服务科外采组休息停止采血时,检测总样本数少于120人份,即未达到核酸“满架”数量,由于单采血小板的临床需求及有效期短,在采集和运输血小板标本已占去1 d的情况下,第2 d就应检测单采血小板样本。因参与混检样本数减少,相应的混检测试数也减少,使得用于阴阳对照和日常室内质控的测试数所占比例增加,导致试剂有效使用率降低;
混检阳性后的拆分也使有效使用率降低,也是不满架的原因。国内有学着认为室间质评样本与已知NAT阴性样本进行混检,既符合质评样本按常规样本检测对待的原则,又能节约试剂成本,并加快血液放行速度[7],这也是提高试剂有效使用率的方法。尽量实现“满架上机”,即每天仅采用一套核酸检测系统,除了做室内质控的那一架为114个样本外,其他尽量为120个或120的倍数。今年,我站供血部门建立并完善了预约发放单采血小板的制度,能有效减少单独检测血小板样本造成的试剂损耗,进一步提高了试剂有效利用率。

3 设备管理 使用时严格依照操作规程要求做好日常维护。日常维护中,混样仪用75%乙醇擦拭Core-Tip金属挡板,丢弃废物桶中垃圾,并更换新垃圾袋,用75%乙醇清洁仪器外罩;
提取仪用75%乙醇擦拭定位桩、机内平台,并清洁试剂针头,清洁样本处理单元(SPU)钳子的抓手,清洁当天要用到的试剂架、样本架和SPU架,擦拭K-carrier,清洁仪器外罩。开始试验前要注意实验室的温湿度,尤其在夏季高温高湿条件下,要提前打开空调降温除湿,使温度不高于25℃,湿度不高于70%,以免仪器在运行时出现意外故障。仪器的液路管道系统方面要注意2个洗液导管中是否有气泡,注射器是否有渗漏和结晶。若洗液导管中气泡量少且较小,可以用手指轻弹有气泡的导管;
若气泡较多、体积较大,可以尝试用软件系统中的长冲洗功能;
若长冲洗后仍有气泡,可能是液路系统的气密性有问题,建议联系工程师检查液路系统。日常维护时要注意软件系统中的其他维护提示,及时对有关部件进行周期性维护和更换。COBAS@ TaqMan(CTM)维护主要是擦拭机内定位桩、工作平台和K-carrier,清洁仪器外罩。以上维护过程中最好使用无纺布擦拭和清洁,以免有线头或纤维丝落入仪器内部,增加污染和导致仪器故障。准备耗材时,有条形码的卡条必须检测其松紧度,可将卡条放置在样本架(SK24)卡槽内,观察其自由下落的情况,若下落到卡槽内的距离较深,说明卡条位置较松,卡条必须丢弃。卡条与S-tube结合过紧也需丢弃。将SPU装载到SPU架子时,一定要按箭头方向并靠右侧孔位放置,放置时用力按压使每个SPU都与架子紧密相贴。

试剂的平衡需在仪器内完成,以免从冰箱取出时温度较低遇到水汽凝集而导致模糊难辨,影响仪器对试剂的识别,一般做完维护后就可以放入[8]。试剂放入时要与上次所使用的提取仪型号相对应,以免出现试剂数量识别错误的情况。需要注意的是每组试剂都有3个有效期的限制,即试剂本身的有效期,在仪器内累计不能超过40 h,开启后累计不能超过20 d,且同一组试剂里,后2个的时间不能相差过大,否则仪器会判定试剂失效。

4 防污染管理 核酸检测的潜在污染可能来自以下几个方面:扩增产物、室内/室间质控物、实验室环境中的污染物及阳性样本。s201针对潜在污染具备4种防污染设计:全自动封闭系统并内置紫外灯;
即插即用型试剂盒;
闭管进,闭管出;
AmpErase酶(尿嘧啶-N-转葡萄糖激酶)。全自动封闭系统、即插即用型试剂盒以及S-tube在进入和离开仪器时都保持闭管状态,可有效阻止实验室环境中的污染物影响检测结果的准确性;
内置紫外灯和AmpErase酶可有效防止仪器内可能残留的扩增产物对实验的影响。

扩增产物是最容易出现的污染,通常一次典型的PCR扩增可以产生109拷贝的靶序列,若气溶胶化,最小的气溶胶都会含有106拷贝的扩增产物,这些气溶胶的累积会污染实验室内的试剂、仪器设备和通风设备,使检测结果出现异常[9]。实验室污染的征兆主要表现为出现大量异常结果,尤其是阴性、阳性对照结果异常,如阴性对照出现阳性结果、阳性对照出现非对应项目的阳性等。

防止室内/室间质控物与样本及样本间的交叉污染,需要操作人员在开盖、转移样本架等过程中防止液体飞溅,并以无菌操作完成相关操作。每次实验室开始前和结束后应认真完成仪器的例行维护,用500 mg/L(2 000 mg/L)二溴海因对实验室台面和地面进行清洁,并用紫外线和臭氧对实验室空气进行消毒,也能有效消除扩增产物遗留造成的污染。

实验室环境中的污染包括混样后的SK24架通过传递窗传送,传递窗为密封严实的双开门,且相互连锁,当一侧的门未关严时,另一侧的门无法打开;
全自动开盖机使用前做好确认工作,保障开盖过程不会造成样本间的交叉污染[10]。每次开盖后及时拿走已开盖的样本,防止仪器在丢弃盖子时有液体飞溅导致其他意外的污染。防止气溶胶产生的污染可以通过设置实验室不同分区间空气的流动方向来实现。我们根据自身条件将核酸实验室分为2部分:标本混样区和提取扩增检测区,2区分别有相互独立且不互通的排风系统,一方面能将本区内产生的气溶胶及时排除,另一方面2区之间的空气不会相互流通,避免其间可能的气溶胶交换。室内/室间质控物和样本分别存放于标本混样区指定区域,避免其与提取扩增检测区中提取和扩增检测仪器可能的接触,也防止潜在的阳性样本对实验室环境和仪器的污染。

经过这些年来对s201的使用,我们认为该检测系统自动化和智能化程度高,人为干扰因素少。质量保证的关键还是样本质量和操作人员规范化操作的执行力度。防污染的思想在实验室设计时就应考虑到,并贯穿于SOP和工作人员的培训中。没有合格的样本、合格的操作者,再好的仪器也不能发挥其功能。

参 考 文 献

1 赵俊鹏,田喜凤,贾幼珍,等. 血液病毒核酸检测与酶联免疫检测比较研究[J].中国病原生物学杂志,2011,10(5):732-735.

2 Wiedmann M,Kluwick S,Walter M,et al. HIV-1,HCV and HBV seronegative window reduction by the new Roche cobas TaqScreen MPX test in seroconverting donors[J]. J Clin Virol,2007,39(4):282-287.

3 王悦,韩玲,赵伟平.20例输血感染案例引起的思考[J].中国输血杂志,2002,6(15):216-218.

4 卫生事业发展“十二五”规划[EB/OL]. [2 0 1 5-09-16]. >

第2篇: 核酸检测问题较多

创新助手报告

——主题分析报告

创新助手平台提供

北京万方软件股份有限公司

2014-06-27


报告目录

报告核心要素 I

一、主题简介 1

二、主题相关科研产出总体分析 1

2.1 文献总体产出统计 1

2.2 学术关注趋势分析 1

三、主题相关科技论文产出分析 1

3.1 中文期刊论文 1

3.1.1 近十年中文期刊论文分布列表 1

3.1.2 中文期刊论文增长趋势 1

3.1.3 发文较多期刊 1

3.1.4 发文较多的机构 2

3.1.5 发文较多的人物 2

3.1.6 核心期刊分布数量对比 2

3.1.7最近相关中文期刊论文 2

3.1.8被引较多的相关期刊论文 2

3.2 学位论文 2

3.2.1 近十年学位论文年代分布列表 2

3.2.2 学位论文增长趋势 2

3.2.3 硕博学位论文数量对比 2

第3篇: 核酸检测问题较多

新型冠状病毒感染疑似或确诊患者

核酸检测标本采集、送检、处理流程

第4篇: 核酸检测问题较多

1.临床实验室若对检测系统进行性能核实,需要进行以下哪组实验(单项该题正确答案:

A.精密度、准确

2.基因芯片技术的本质是(单项)该题正确答案:

A、核酸分子杂交技术

3.新型冠状病毒肺炎患者行有创机械通气时,正确的方法是(。(单项)该题正确答案:

D.小潮气量和低吸气压力

4.合成RNA的原料是:(单功该题正确答案:

C、NTP

5.个人防护装置是用于防止人员个体受到生物性、化学性或物理性等()伤害的器材和用品。(单项该题正确答案:A危险因子

6.标记的参与杂交反应的已知核酸序列是(单项该题正确答案

探针

7.级A1型和A2型生物安全柜的通风连接是使用:(单项该题正确答案

A套管“或“伞型罩“连接

8.第三代测序技术的特征(单项该题正确答案

E、单分子测序

9.新冠病毒核酸检测实验室中,不属于净化实验室专用门特点的是:(单项该题正确答案D以上均不是

10.以下对应关系正确的是()(单项)该题正确答案:

B.敏感性一一真阳性/真阳性+假阴性)*100%

11.目前的DNA自动化测序技术可以一次性读取的序列长度约(单项)

该题正确答案 D、1000bp

关于分子信标技术的描述,不正确的是(单项该题正确答案

E、分子信标设计简单

13.国的生物安全实验室一定要按照国务院发布的()进行管理。(单项)该题正确答案:

A《病原微生物实验室生物安全管理条例》

14.从鼻咽拭子中提取的检测新型冠状病毒的剩余核酸提取物不可用于哪种病原体诊断(单项该题正确答案

D丙型肝炎病毒

15.退火温度是决定PCR反应特异性的关键因素,通常退火温度为()该题正确答案

C.Tm减5℃

16.实验室人员培训的主要容:0(单项该题正确答案E以上都是

17.下列关于 Taq DNA聚合酶的描述,正确的是(单项该题正确答案

E、在引物的3-OH末端加入脱氧单核苷酸,形成3",5磷酸二酯键

18.下列关于恒温金属浴的使用说法错误的是()(单项该题正确答案

D孔位不足时,可将0.5mEP管放入1.5m加热孔中进行热裂解,加热时间不变。

9.脱卸三级防护装备的顺序是:0(单项该题正确答案:

A.鞋套→护目镜→外层手套→防护服→帽子→层手套→口罩

20.下列哪项不是临床分子生物学检验分析前质量控制的容()(单功该题正确答案

E.进行核酸提取的有效性评价

21.在核酸检测体系中加入质控,其作用不是监控的是(单项)

该题正确答案

D.样本吸取错误所致的假阴性

22.生物危害是指各种生物因子对()、环境和社会造成的危害。(单项)

该题正确答案:;

室间质量评价的目的和作用不包括下列哪项(单项)该题正确答案

提高实验室的社会地位

29.室间质量评价的目的和作用不包括下列哪项(单项)该题正确答案

E.提高实验室的社会地位

30.下述哪条质控规则指示随机误差造成的失控(单项该题正确答案:

D.R4s规贝

31.性能验证计划应包括的容有()(不定项)该题正确答案:

A.验证项目容

B.待验证性能指标;

C.验证实施方案;

D.结果判断标准;

32.关于新型关冠状病毒感染病例出院标准,下列说确的是()(不定项)该题正确答案

A.体温恢复正常3天以上。

B.呼吸道症状明显好转。

D.连续2次痰、鼻咽拭子等呼吸道标本病原核酸检测阴性(采样时间间隔至少24小时)。

33.实验室生物安全管理主要相关法律法规:()不定项该题正确答案:

A病原微生物实验室生物安全管理条例(国务院424令);

B实验室生物安全通用要求(GB19489-2008)

C生物安全实验室建筑技术规(GB503462011);

D人间传染的病原微生物名录(2006)。

34.加样枪漏液的可能原因是()(不定项)该题正确答案

A吸头不合适或松了

B活塞密封圈损坏

C活塞被积存的试剂污染

D鼻尖部松动或不密封

35.如新冠核酸检测,阳性质控品检出为阴性,以下处理正确的是()(不定项该题正确答案:

A、重新检测当次新冠标本C、分析失控原因

36.临床分子生物学检验中阳性质控样本失控的原因可能为()(不定项该题正确答案

A.试剂问题

B.仪器问题

D.核酸提取过程中的随机误差

37.如果新冠核酸检测为(ORF1a/b、N)单靶点阳性,以下做确的是()(不定项该题正确答案:

B、同一个标本重复检测,如两次同一靶点阳性,判读为阳性结果

C、重新取样进行检测,如两次同一靶点阳性,判读为阳性结果

38.实验室清洁及其防止污染措施有()(不定项该题正确答案

A实验室地面必须整洁

B合理规划摆放实验室物品

C物品要作为各区标识,以便识别

D实验结束后用2000mg/L有效氯消毒液对台面进行清洁,并用移动紫外灯照射消毒。

实验室应制定检验报告单的发放程序,容应包括检验报告单的()(不定项该题正确答案

A.报告单发放方式

B发放时间

C基本格式

D结果措施

40.可能对PCR检测产生干扰的物质包括0(不定项)该题正确答案:

A.与待测病原体具有同源性核酸序列的其他病原体;

B.可能产生相同或相似临床症状的病原体

C.治疗过程中的某些药物

D.人类基因组DNA

41.医疗咨询解决时限()(不定项该题正确答案

A临床沟通小组对咨询者口头、提出的问题,应立即回答

B如不能立即回答,应告知再次联系的方式,原则上3日给予答复。

C对于书面、信函等方式提出的咨询,在咨询者要求时限给予解答。

D沟通小组成员不能在规定的时限解答咨询者提出的问题时,应上报科主任,由科主任负责解答。

42.根据血清型和基因组的特点,冠状病毒亚科被分为a、阝、γ和8四个属。目前已知可感染人的冠状病毒包括(不定项

该题正确答案

A HCOV-229E HCOV-NL63

B. HCOV-OC43. HCOV-HKUT

C. MERS-COV

D SARS-COV SARS-COV-2

43.小儿新型冠状病毒感染与成人比较有哪些差别?()

该题正确答案:

A.小儿患者症状一般较轻,部分病例症状可不典型,表现为呕吐、腹泻等消化道症状。

B.小儿影像学显示胸腔积液是重型、危重型的临床预警指

44.实时荧光PCR技术用于临床病原体检测的优点是()(不定项

该题正确答案

A可实现定量检测

B灵敏度高

C闭管检测污染小

D操作简便

45.PCR变性过程中DNA的变化特点()(不定项)该题正确答案:

A.双链DNA的解螺旋C氢键断裂

实验室的所有设备均应粘贴三色标识”,下列叙述正确的是()(不定项该题正确答案:

B.“黄色”标识表示有部分缺陷,但不影响检测所需的某项功能,经过校准、检定或质控仍然合格

C,“红色标识表示仪器设备处于停用状态

D.“绿色”标识表示仪器经过校准、检定、厂家验收合格或检查功能正常

47.1级生物安全柜分为哪几类()(不定项)该题正确答案

A B C D

48.做性能验证,实验室条件包括哪些()(不定项)该题正确答案:

A.仪器的维护保养和校准

B.室质控

C.试剂、校准品

D.人员

49.临床基因扩增检验实验室设计的原则主要包括()(不定项

该题正确答案A.分区设置

E.控制空气流向

50.核酸检测实验室质量管理的特点是()(不定功该题正确答案:

A技术人员必须具有牢固的“无基因或无核酸概念

B建立严格人员进入限制和相关流程

C使用合格的仪器设备、试剂和消耗品

1.新冠病毒核酸检测实验室气流组织宜采用:(单项)该题正确答案A上送下排

2.以下对应关系正确的是()(单项)该题正确答案

B.敏感性一一真阳性/(真阳性+假阴性)*100%

3. ddntp与dNTP的区别是在脱氧核糖的3位置缺少了(单

该题正确答案:A、一个羟基

4.在学习第七版新冠肺炎诊疗方案基础上,省新型冠状病毒肺炎疫情防控指挥部结合当前疫情状况,提岀留观病例的样本要在()小时送检,检测机构要在()小时检测并通报结果。(单项)该题正确答案:

B.2;6

5.某临床分子生物学检验项目每2周检测1次,最适用的统计学质控方法是(单项该题正确答案:

B.即刻法质控方法

6.下述哪条质控规则指示随机误差造成的失控(单项该题正确答案:

D.R4s规则

7.加样枪校准的要求错误的是以下哪一项()(单项该题正确答案

D由于实验室加样枪较多,只需记录校准结论

8.下列属于新型冠状病毒感染的肺炎临床分型重型的是)(单项

该题正确答案

E、肺部影像学显示24-48小时內病灶明显进展>50%。

9.室间质量评价的工作流程不包括下列哪项(单项该题正确答案

D.与兄弟实验室对比检测数据

效空气过滤器通常是滤除大于等于()微米微粒,滤除效率符合相关要求的过滤器。(单项该题正确答案

A0.3

11.有关性能验证的判定标准该题正确答案

C.试剂盒说明书中声明的性能指标

12.什么是性能验证()(单项)该题正确答案:

C.特指使用某特定检测试剂或系统的实验室按照所提供的试剂盒或检测系统说明书使用时,能复现生产厂家所宣称的检测性能

13.新型冠状病毒特异性lgM抗体多在发病()天后开始出现阳性,IgG抗体滴度恢复期较急性期增高()倍以上作为新型冠状病毒感染血清学的诊断标该题正确答案:

3-5:4

14.1级A1型和A2型生物安全柜的通风连接是使用:(单

该题正确答案

A"套管”或“伞型罩”连接

15.循环阈值与起始拷贝数的对数成()(单项该题正确答案:B.反比例线性关系

16.根据有限的尸检和穿刺组织病理观察结果,新型冠状病毒肺炎的病理表现()(单项该题正确答案:

B.‖型肺泡上皮细胞显著增生

17.实验室人员培训的主要容:0(单项)该题正确答案:

E以上都是

18.有关生物安全柜安装位置最为理想的是:(单项该题正确答案

A将生物安全柜安装在远离人员活动、物品活动以及可能扰乱气流的部位

19.性能验证的5WH指什么()(单项)该题正确答案

A. Why,

20.关于 SYBR Green I的描述,不正确的是该题正确答案特异性强

1.下列关于医疗废弃物处理正确的是:0(单项该题正确答案

22.不属于新冠病毒核酸检测实验室关键参数的是:(单项)该题正确答案:缓冲间

23.下列关于病毒的描述错误的是()(单该题正确答案:

C.属于原核细胞型微生物

24.不能溯源至Sl单位的情况有以下哪种(单项该题正确答案:E.以上都是

25.一般的核酸扩增实验室可以不用缓冲间的是哪个区(单项

该题正确答案产物分析区

6.新型冠状病毒感染基于目前的流行病学调查,潜伏期为()天,多为()天,治愈出院患者需再隔离天

该题正确答案

27.下列关于新型冠状病毒描述错误的是((单项)该题正确答案

SARS-CoV-2的基因特征与SARS-CoV基本一致

28.目前已知感染人类最大的RNA基因组病毒是(单项该题正确答案SARS冠状病毒

29.关于可灭活的样本保存液,说法错误的是()(单项该题正确答案:

C.含有病毒裂解液的保存液可以用于病毒培养

30.通过呼吸道感染并通过血液扩散的病毒是()(单项该题正确答案C.麻疹病毒

31.脱卸三级防护装备的顺序是:0(单项)该题正确答案:

A.鞋套→护目镜→外层手套→防护服→帽子→层手套→32.新冠病毒样本的采集操作穿戴个人防护装备错误的是:

该题正确答案:B.1层乳胶手套

33.病原体核酸扩增检测的假阴性可能的原因有()(不定该题正确答案:

A.试剂盒质量问题

B标本处理不当

C.抑制物的存在

34. Westgard多规则质控方法包括()(不定项该题正确答案

A.12s规则

B.22s规贝

C、10x规则

D.R4s规则

E、41s

35.常用的荧光标记探针有()该题正确答案

A.水解探针

B.杂交探针

C.分子信标

D.MGB探针

E. Taqman探针

36.鼻咽拭子采集方法描述正确的有()(不定项)该题正确答案:

B.釆集拭子应选用植绒拭子

C.采集时应从鼻腔沿下鼻道底部向后缓缓进入至有阻力

D.清清旋转一周再缓慢取出拭子

37.加样枪漏液的可能原因是()(不定项该题正确答案:

A吸头不合适或松

B活塞密封圈损坏

C活塞被积存的试剂污染

D鼻尖部松动或不密封

38.实时荧光PCR技术用于临床病原体检测的优点是(

该题正确答案:

A可实现定量检测

B灵敏度高

C闭管检测污染

D操作简便

39性能验证计划应包括的容有0(不定项该题正确答案

A.验证项目容待验证性能指标

C.验证实施方案;

D.结果判断标准;

40.实验室生物安全管理主要相关法律法规:()(不定项该题正确答案:

A病原微生物实验室生物安全管理条例(国务院424令)

B实验室生物安全通用要求(GB194892008);

C生物安全实验室建筑技术规(GB503462011)

D人间传染的病原微生物名录(2006)。

41.下列光源中可用作实时荧光PCR仪激发光源的是()该题正确答案:A卤钨灯灯 C LED

D氙灯

42.实验过程中如发生标本或试剂外溅,应采取的措施(

该题正确答案

毒液滴

A立即用2000mg/有

B滤纸盖上30分钟

C用75%酒精擦洗

D用移动紫外灯消毒。

43.对于室间质量评价标本处理不正确的是()(不定项该题正确答案

A.反复多次测定后推定一个值报告,以保障结果准确

B.应指专人在最佳条件下检测,必要时将质评物交其它实验室代做,以保证结果准确可靠

D同级实验室间相互交流检测结果后报告,以免出现较大误差

E.以上都对

下列属于等位基因特异性寡核苷酸的方法是)(不定该题正确答案

A狭缝印迹杂交

B反向杂交

c.斑点印迹杂交

45,以下措施可以预防PCR的实验室污染,除外(不定该题正确答案:

C.在反应体系中使用dUTP代替

D.减少摸板核酸用量

46.根据第7版新型冠状病毒感染的肺炎防控方案,对于新型冠状病毒感染伴有严重ARDS患者,如条件允许,当出现下哪些情况时应尽快考虑体外膜肺氧合?()(不定项该题正确答案:

A.在Fio2>90%时,氧合指数小于80mmHg,持续3-4/时以上

B.气道平台压≥35cmH20;

C.俯卧位通气效果不佳

PCR实验室的防污染方法有()(不定项该题正确答案

A严格按照各区功能划分来执

B使用清洁的实验用

C实验操作务必正确

D实验设计应规

48.关于2019新型冠状病毒肺炎的描述,从目前收治病例情况看,下述哪些正确?()该题正确答案

A多数患者预后良好

49.以下哪些防护装备属于三级防护用品()(不定项该题正确答案:

A、护目镜

C、N95口罩

D、面罩

E、乳胶手套

50.实时PCR通过对荧光信号的检测实现了对PCR过程中实时监测荧光信号的检测的主要方法有0(不定项该题正确答案A水解探针技术D杂交探针技术D分子信标

51.疑似病例具备以下哪些病原学证据即可诊断为确诊病该题正确答案

A. RT-PCR检测新型冠状病毒核酸阳性;

B.病毒基因測序,与已知的新型冠状病毒核酸阳性

C.血清新型冠状病毒特异性lgM抗体和lgG抗体阳性

D.血清新型冠状病毒特异性lgG抗体由阴性转为阳性;血清新型冠状病毒特异性lgG抗体恢复期较急性期升高4倍及以上

52.实验室应制定检验报告单的发放程序,容应包括检验报告单的()该题正确答案

A.报告单发放方式

B发放时间

C.基本格式

D结果措施

1.试剂盒中的标准品和质控品应保存在(单项)该题正确答案

B.标本制备区

2.标法的优点不包括下列哪项()(单项该题正确答案B.重复性不好

3.以下哪项是新型冠状病毒肺炎疑似病例的排除标准该题正确答案:

D、连续2次新冠病毒核酸检测为阴性(采样时间至少间隔24小时),且发病7天后新型病毒特异性抗体lgM和lgG仍为阴性

4.提取核酸的质量可以通过下列哪种方法直接判断()(单该题正确答案:A分光光度法测定

5.关于定量PCR,错误的是0(单项该题正确答案

A、可以定量或半定量检测PCR产物的方法

6.新冠病毒核酸检测过程中产生废液废物在拿出实验室之前必须()。(单该题正确答案

B彻底灭菌

7.什么是性能验证()(单项)该题正确答案:

特指使用某特定检测试剂或系统的实验室按照所提供的试剂盒或检测系统说明书使用时,能复现生产厂家所宣称的检测性能。

8.以下哪项不是培训考核的方式:0(单项)该题正确答案

D问卷

9.相对于第一代测序技术,下一代测序技术不具有的优点该题正确答案

D、较长的测序读长

10.进行新冠核酸检测时,以下哪种情况需要更换外层手该题正确答案

触碰到新冠采样管新冠标本

B、在生物安全柜操作完成,换生物安全柜外操作

C、打包处理新冠标本后

11.关于病例的发现与报告以下正确的是()(不定项该题正确答案

A.发现符合病例定义的疑似病例,可立即集中隔离治疗发现符合病例定义的疑似病例后,院专家会诊或主诊医师会诊后,仍考虑疑似病例,应在2小时进行网络直报C.采集标本进行新型冠状病毒核酸检测,在确保转运安全前提下立即将疑似患者转运至定点医院

E疑似病例连续两次新型冠状病毒核酸检测阴性(采样时至少间隔24小时)且发病7天后新型冠状病毒特异性抗体IgM和lgG仍为阴性可排除疑似病例诊断

12.以下属于气溶胶的特点是()(不定项该题正确答案

A无色无味、无孔不入,不易发现

B传播容易发生病原体在人与人、与动物和动物间的传播

C有些微生物气溶胶感染的症状不典型,病程复杂,难以及时诊治,影响预后

13.PCR测定中的“污染主要是指()该题正确答案:D.扩增产物的污染

14.符合相关法规和标准的生物安全实验室是可以避免0)受到不可接受的损害()该题正确答案:

A实验室人员

B来访人员

C社区

15.新型冠状病毒主要的传播途径包括()(不定项)该题正确答案:

A.呼吸道飞沫传播

B.接触传播

16.新冠病毒核酸检测可采集的标本种类包括()(不定项)该题正确答案

A.上呼吸道标本:鼻拭子、咽拭子等

B下呼吸道标本:深咳痰、肺泡灌洗液、支气管灌洗液等

C.粪便标本或肛拭子

D.血液标本

17.临床分子生物学检验中阳性质控样本失控的原因可能为()(不定项该题正确答案

A.试剂问题

B.仪器问题

D.核酸提取过程中的随机误差

18.下列哪些可以作为核酸探针使用()(不定项)该题正确答案:

B单链DNA

C寡核苷酸

DMRNA

19.下列病毒中核酸类型为RNA的病毒有()(不定项)该题正确答案:

B.冠状病毒

C.流感病毒

D.脊髓灰质炎病毒

1.下列哪些是PCR反应必需的成分(单项)该题正确答案E、镁离子

2.依据《可感染人类的高致病性病原微生物菌(毒)种或样本运输管理规定》,运输高致病性病原微生物菌(毒种或样本时,专业护送人员不得少于()人(单项)该题正确答案:

3.以下哪项是新型冠状病毒肺炎疑似病例的排除标准(该题正确答案

、连续2次新冠病毒核酸检测为阴性(采样时间至少间隔24小时),且发病7天后新型病毒特异性抗体lgM和lgG仍为阴性

4.新型冠状病毒感染基于目前的流行病学调查,潜伏期为0天,多为0天,治愈出院患者需再隔离(天(单项)

该题正确答案 1-14;3-7;14

5.对于测量正确度的描述不正确的是:((单项该题正确答案:

B测量系统的随机误差;

6.不属于新冠病毒核酸检测实验室关键技术措施是:(单该题正确答案D传递窗

7.在定量PCR测定中,对原始模板准确定量的影响因素中,最大的是:0(单项该题正确答案

B.扩增效率

8.提取核酸的质量可以通过下列哪种方法直接判断()(单该题正确答案A分光光度法测定

9.下列各种碱基互补形式中,哪种的配对最不稳定(单项该题正确答案:

10.单链DNA5- pcpgpgptpa-3能与下列哪种RNA单链分子进行杂交(单项该题正确答案:

C.5′- PUPAPCPCPG-3

11.用于病毒基因突变检测的技术是(单项)该题正确答案

B PCR-RFLP技术

12.新型冠状病毒核酸检测阴性的含义是()该题正确答案:

A.患者没有感染新型冠状病毒

E.检测样本中的病毒载量低于试剂检测限

13.以下属于气溶胶的特点是()(不定项该题正确答案

A无色无味、无孔不入,不易发现

B传播容易发生病原体在人与人、与动物和动物间的传播

C有些微生物气溶胶感染的症状不典型,病程复杂,难以及时诊治,影响预后

14.鼻咽拭子采集方法描述正确的有()(不定项该题正确答案

B.采集拭子应选用植绒拭子

C.采集时应从鼻腔沿下鼻道底部向后缓缓进入至有阻力

D.清清旋转一周再缓慢取出拭子

15.PCR检测项目分析特异性验证包括((不定项)该题正确答案

B.抗干扰能力;D.交叉反应验证。

16.实时PCR通过对荧光信号的检测实现了对PCR过程中实时监测荧光信号的检测的主要方法有0(不定项该题正确答案:A水解探针技术D.杂交探针技术D分子信标

17.根据血清型和基因组的特点,冠状病毒亚科被分为a、β、γ和四个属。目前已知可感染人的冠状病毒包括((不定项)

该题正确答案:

A HCOV-229E. HCOV-NL63

B. HCOV-OC43 HCOV-HKUT

C. MERS-COV

D SARS-COV SARS-COV-2

18.新型冠状病毒主要的传播途径包括((不定项该题正确答案:

A.呼吸道飞沫传播

B接触传播

19.对的检验项目,可通过与其他实验室比对的方式判断检验结果的可接受性,比对正确的做法是()(不定项该题正确答案:

A至少每年2次

B.每次比对至少使用5份标本

D所用标本应包括正常和异常浓度水平应有至少80%的结果符合要求,才算合格

20.以下能够保护和提高DNA聚合酶活性的是()该题正确答案:

AMgc12

B.小牛血清清蛋白

C Tween20

1.临床实验室若对检测系统进行性能核实,需要进行以下哪组实验(单项该题正确答案

A.精密度、准确

2.下列哪些是PCR反应必需的成分(单项)该题正确答案:E、镁离子

3.二级防护屏障是通过()的特殊设计,达到对实验室外环境的生物安全保护,防止实验窒以外的人员、环境暴露于从实验室偶然逃出的微生物。(单项)该题正确答案

A实验室设施

4.对于PCR检测项目进行性能验证,哪个指标不是必需的该题正确答案D.可报告区间

5.一般的核酸扩增实验室设置原则是:各区独立,注意风向,因地制宜和()(单项该题正确答案

A防止污染

DNA变性的描述不正确的是(单项)该题正确答案B.一级结构破坏

7.有关生物安全柜安装位置最为理想的是:(单项该题正确答案

A将生物安全柜安装在远离人员活动、物品活动以及可能找乱气流的部位

8.如果釆用全自动核酸提取扩增仪,实验室至少需要分几个区?()(单项)该题正确答案

B.试剂准备区,样品制备区

9.病毒感染细胞的关键物质是(单该题正确答案

A.核酸

10.新冠病毒肺炎暂定第几类病原微生物管理:(单项该题正确答案:B第

11,新冠病毒核酸检测可采集的标本种类包括((不定项)该题正确答案

A.上呼吸道标本:鼻拭子、咽拭子等

B.下呼吸道标本:深咳痰、肺泡灌洗液、支气管灌洗液等

C.粪便标本或肛拭子

D.血液标本

12.鼻咽拭子采集方法描述正确的有0(不定项该题正确答案

B.采集拭子应选用植绒拭子

C.采集时应从鼻腔沿下鼻道底部向后缓缓进入至有阻力

D.清清旋转一周再缓慢取出拭子

13.某患者疑似新型冠状病毒(SARS-CoV-2)感染引起的

2019新型冠状病毒病( COVID-19),在发病的第3~4天,应采集何种标本类型进行SARS-CoV-2核酸检测()(不定

该题正确答案A.咽拭子

C.肺泡灌洗液

14.关于病例的发现与报告以下正确的是()(不定项)该题正确答案

A.发现符合病例定义的疑似病例,可立即集中隔离治疗

B.发现符合病例定义的疑似病例后,院专家会诊或主诊医师会诊后,仍考虑疑似病例,应在2小时进行网络直报C.采集标本进行新型冠状病毒核酸检测,在确保转运安全前提下立即将疑似患者转运至定点医院

E.疑似病例连续两次新型冠状病毒核酸检测阴性(采样时间至少间隔24小时)且发病7天后新型冠状病毒特异性抗体IgM和lgG仍为阴性可排除疑似病例诊断

15.下列关于冠状病毒说确的是0(不定项)该题正确答案

A.冠状病毒是一类具有囊膜的线性单股正链RNA病毒,基因组大小约27-31kb

B.冠状病毒是目前已知RNA病毒中基因组最大的病毒。

C.根据血清型和基因组特点,冠状病毒亚科被分为aY和6四个属。

16.对没有开展室间质量评价的检验项目,可通过与其他实验室比对的方式判断检验结果的可接受性,比对正确的做法是()(不定项该题正确答案

A至少每年2次

B.每次比对至少使用5份标本

C.所用标本应包括正常和异常浓度水平

D.应有至少80%的结果符合要求,才算合格

1.新冠病毒核酸检测实验室排风系统全部采用:(单项)该题正确答案

A高效过滤净化

2.新冠病毒核酸检测的操作者生物安全防护水平要

该题正确答案C三级水平

3. Taqman探针技术要求扩增片段应在(单项该题正确答案

A、50-150bp

4.潜伏感染是指((单项该题正确答案

D.病毒基因在体持续存在,激活后复制引起临床症状

5.机械连锁不锈钢传递窗确保试剂和()在转移过程中不受染。(单项)该题正确答案

样品

6.一般的核酸扩增实验室设置原则是:各区独立,注意风向,因地制宜和()(单项)该题正确答案

A防止污染

7.关于数字PCR技术描述错误的是()(单该题正确答案

D没有标准曲线,数字PCR就无法进行绝对定量

8.二级防护屏障是通过()的特殊设计,达到对实验室外环境的生物安全保护,防止实验室以外的人员、环境暴露于从实验室偶然逃出的微生物。(单项)该题正确答案

A实验室设施

9.分子信标等实时定量PCR技术可以用于哪些方面(

该题正确答案:

A基因表达检测

B基因突变分析

C.活细胞核酸动态分析

D核酸杂交

E.DNA和蛋白质的相互作用

10.下列关于加样枪校准的说确的是()(不定项该题正确答案

A所有加样枪均需定期校准

C必须先有加样枪校准SOP,方可进行加样枪校准

1.扩增产物污染是PCR反应中最主要最常见的污染问表现在()(不定项该题正确答案

A大量拷贝的产物泄漏

B扩增后PCR反应管意外开盖

2.可以进行新冠核酸检测的人员包括()(不定项该题正确答案

A、具有PCR上岗证和检验技师,经过新冠检测培训并合格者

D、具有PCR上岗证和医师,经过新冠检测培训并合格者

13.病毒感染机体侵入途径包括()(不定项该题正确答案

A呼吸道

B.消化道

C皮肤粘膜

D血液

14.可能对PCR检测产生干扰的物质包括0(不定项)该题正确答案

A.与待测病原体具有同源性核酸序列的其他病原体;

B.可能产生相同或相似临床症状的病原体;

C.治疗过程中的某些药物;

D.人类基因组DNA

15.高通量测序方法在下面哪种实验中应用()(不定项)该题正确答案

A.基因表达谱检

B全基因组变异检测基因组甲基化检测E非编码RNA表达检测

16.在核酸检测体系中加入质控,其作用是监控()

该题正确答案

A.标本中抑制物或干扰物所致的假阴性

B.仪器故障如扩增仪孔间温度差异所致的假阴性核酸提取效率太低所致的假阴性

E.试剂失效或 Taq DNA聚合酶活性降低所致的假阴性

17.以下哪些是不合格的分子生物学检验标本,应予退检

(不定项该题正确答案

A.使用肝素抗凝的血标本

C.标本条形码上的标本类型与实际的标本类型不符

D.标本溶血

E.标本容器破损

14.下列核酸提取方法中不需要使用有机化学溶剂的是()(不定项)该题正确答案

B碱裂解法

C加热裂解法

D磁性分离法

7.下列病毒中,可以通过呼吸道感染的有()(不定项)该题正确答案

A.鼻病毒

B.冠状病毒

8.下列光源中可用作实时荧光PCR仪激发光源的是()(不定项)

该题正确答案:A卤钨灯

CLED灯

D氙灯

9.下列哪些病毒是RNA病毒()(不定项)该题正确答案

A冠状病毒

B反转录病毒

C. HIV

DHCV

10.下列病毒中核酸类型为RNA的病毒有()(不定项)该题正确答案

A冠状病毒

C.流感病毒

D.脊髓灰质炎病毒

11.实时PCR通过对荧光信号的检测实现了对PCR过程中实时监测荧光信号的检测的主要方法有0)(不定项)该题正确答案

A水解探针技术杂交探针技术D分子信标

12.新型冠状病毒主要的传播途径包括()(不定项)该题正确答案

A.呼吸道飞沫传播

B接触传播

13.关于不合格样品的处理流程,说确的是()(不定该题正确答案:

A.在样品接收进程中被发现时,接样者应进行拒收,并反给样品采集部门,做好相关登记

C在检测过程中被发现时,样品检测者应进行网上回退并通知相关临床科室,并做好相关登记

D如果检验结果已经发布,则应在必要时收回,或以适当方式进行标记

E在检测后被发现时,审核者应立即与检测申请者沟通,

原则上,临床基因组扩增检验室应设置如下哪些工作区域()(不定项该题正确答案

A.试剂储存和准备区

B.标本制备区

C.扩增区

D.产物分析区

2.BSL2实验室是在一级生物安全防护水平的基础上,主要增加的生物安全设备是该题正确答案

A生物安全柜高压灭菌器

3.根据第7版诊疗规,以下关于2019新冠病毒肺炎重症、危重症患者治疗措施不恰当的有()(不定项)该题正确答案

A.防止继发细菌感染,尽早使用抗菌药物,尤其是联合使用广谱抗菌药物

B.在采取有创呼吸支持时,要加强并尽可能延长镇静时

D.康复者血浆治疗不建议用于病情进展期、新冠病毒活动性感染者,晚期病例效果更佳;

4.常用的检测新型冠状病毒核酸的靶基因有()(不定项)该题正确答案

A. Orf1ab C E

5.以下哪些是不合格的分子生物学检验标本,应予退检()(不定项)该题正确答案

A.使用肝素抗凝的血标本

C.标本条形码上的标本类型与实际的标本类型不符标本溶血

E.标本容器破损

6.对于室间质量评价标本处理不正确的是()(不定项)该题正确答案

A.反复多次测定后推定一个值报告,以保障结果准确

B.应指专人在最佳条件下检测,必要时将质评物交其它实验室代做,以保证结果准确可靠

D.同级实验室间相互交流检测结果后报告,以免出现较大误差

E.以上都对

10.某患者疑似新型冠状病毒( SARS-COV.2)感染引起的

2019新型冠状病毒病( COVID-19),在发病的第3~4天,应采集何种标本类型进行SARS-CoV-2核酸检测()(不定

该题正确答案:

A.咽拭子

B.痰

C.肺泡灌洗液

11.空隙LCR体系扩增产物时需要以下哪些酶0)(不定项该题正确答案:

BDNA连接酶

C.DNA聚合酶

12.未知核酸点突变的检测方法有()(不定项)该题正确答案:

A单链构象多态性

B生物芯片

E变性梯度凝胶电泳

1.S015189对分子诊断人员要求,正确的是:0(单项)该题正确答案

C.专业组组长一一中级及以上、3年以上分子诊断工作经

2.关于病毒的致病机制,错误的叙述是()(单该题正确答案

3.如果需要吸取100μ的液体,最好使用以下哪个型号加

(单项该题正确答案

B、10~100ul

4.在核酸检测体系中加入质控,其作用不是监控的是该题正确答案

D.样本吸取错误所致的假阴性

5. Taq DNA聚合酶不具有以下哪个特点()(单项该题正确答案

D.3→5核酸外切酶活性

6.下列哪些可以作为核酸探针使用0(不定项题正确答案

B单链DNA

C寡核苷酸

DMRNA

7.下列哪些可以作为荧光定量的外参系统()(不定项)该题正确答案

A化学合成的标准品

B构建的质粒标准品

C病毒颗粒

D反转录的cDNA

8.Ⅱ1级生物安全柜分为哪几类()(不定项)该题正确答案

9.从临床样本中将核酸提取纯化出来的原则和要)(不定项)该题正确答案

A.保证核酸一级结构的完整性

B排除其他分子的污染

C.去除PCR反应抑制物

8. Westgard多规则质控方法包括()(不定项)该题正确答案

A.12s规贝

B.22s规则

C.10x规

D.R4s规

E.41s规则

9.根据第7版诊疗规,以下关于2019新冠病毒肺炎重症、危重症患者治疗措施不恰当的有()(不定项该题正确答案

A.防止继发细菌感染,尽早使用抗菌药物,尤其是联合使用广谱抗菌药物

B.在釆取有创呼吸支持时,要加强并尽可能延长镇静时

D.康复者血浆治疗不建议用于病情进展期、新冠病毒活动性感染者,晚期病例效果更佳

1.根据新型冠状病毒传播特性、致病性和临床资料等信息,该病毒应按照()病原微生物进行管理。(单项)该题正确答案

第二类

2.一般的核酸扩增实验室中必须正压的是哪个区?(单项)该题正确答案

A试剂准备区

3.新冠病毒肺炎暂定第几类病原微生物管理:(单项)该题正确答案:

B第

4.一般而言,导致加样枪移液不准确的最主要原因是()(单项

该题正确答案A没有润洗吸头

5.关于PCR反应引物的描述,不正确的是(单项)该题正确答案:

D、引物的3`端可以带有生物素、荧光或酶切位点等作为标记

6.二级防护屏障是通过()的特殊设计,达到对实验室外环境的生物安全保护,防止实验室以外的人员、环境暴露于从实验室偶然逃出的微生物。(单项)该题正确答案

A实验室设施

7.对没有开展室间质量评价的检验项目,可通过与其他实验室比对的方式判断检验结果的可接受性,比对正确的做法

(不定项)该题正确答案:

A.至少每年2次

B.每次比对至少使用5份标本

C.所用标本应包括正常和异常浓度水平

D.应有至少80%的结果符合要求,才算合格

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